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山合欢皮中总皂苷含量比较

时间:2006-11-26栏目:药学论文

  山合欢皮中总皂苷含量比较
  
  Abstract:Objective To compare the content of saponin in Bark of Silktree Albizziae and Bark of Silktree Albizziae kaldora derived from different collection periods. Method Spectrophotometry was used to determine the contents of saponin. Result The contents of saponin in one-year Bark of Silktree Albizziae is different from two-year Bark of Silktree Albizziae (P<0.05)。 The contents of saponin in two-year Bark of Silktree Albizziae is the same as multi-year Bark of Silktree Albizziae (P>0.05)。 The contents of saponin in multi-year Bark of Silktree Albizziae is different from multi-year Bark of Silktree Albizziae kaldora (P<0.05)。 Conclusion The content of saponin in Bark of Silktree Albizziae and Bark of Silktree Albizziae kaldora derived from different collection periods is quite different.
  
  Key words:collection periods;Bark of Silktree Albizziae;Bark of Silktree Albizziae kaldora;saponin
  
  合欢皮为豆科植物合欢Albizia julibrissin Durazz.的干燥树皮,具有解郁安神、活血消肿的功能,用于心神不安、忧郁失眠、肺痈疮肿、跌扑伤痛等症[1].据调查,在商品药材中,以同属植物山合欢Albizia kalkora (Roxb.) Prain皮代替合欢皮应用的现象时有发生,但2005年版《中华人民共和国药典》(一部)只把合欢皮作为正品收载,而山合欢皮属于混淆品。皂苷类化合物是合欢皮中主要的有效成分,皂苷含量的高低直接影响着合欢皮药物的疗效。为了解不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量的差别,本试验对一年生、二年生与多年生的合欢皮与山合欢皮中总皂苷进行了测定比较,为新药研究和充分利用合欢皮药材资源提供一定的参考依据。
  
  1 材料
  
  1.1 药物
  
  合欢Albizia julibrissin Durazz.与山合欢Albizia kalkora (Roxb.) Prain一年生、二年生与多年生的树皮采自济南郊区,由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定。齐墩果酸对照品,中国药品生物制品检定所提供,批号110709- 200604.
  
  1.2 仪器与试剂
  
  UV-2201型紫外可见分光光度计(日本岛津),MA110型电子天平,DZKW-C型电子恒温水浴箱。试验所用试剂均为分析纯。
  
  2 方法
  
  2.1 测定波长的选择
  
  齐墩果酸与香草醛浓硫酸加热反应生成物在540 nm处显示最大吸收波长。由于合欢皮与山合欢皮所含皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型[2],与香草醛浓硫酸加热反应生成物的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选定齐墩果酸为标准对照品,540 nm为测定波长。
  
  2.2 供试品溶液的制备
  
  合欢皮与山合欢皮粉碎过40目筛,60 ℃恒温烘2 h,置干燥器中备用。精密称取样品各2 g,置索氏提取器中,加甲醇适量,回流提取至无皂苷反应(约7 h),减压回收甲醇,用适量水溶解残渣,转移至分液漏斗中,禁药脱脂,用水饱和的正丁醇萃取4次,合并正丁醇萃取液,减压回收正丁醇,残渣用少量甲醇溶解,过滤,滤液置10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
  
  2.3 对照品溶液的制备
  
  精密称定干燥至恒重的齐墩果酸适量,用甲醇制成每1 mL含1.22 mg的溶液,作为对照品溶液。
  
  2.4 标准曲线的制备
  
  精密量取齐墩果酸对照品溶液20、40、60、80、100 μL,分别置于试管中,挥干;精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5 mL和72%硫酸溶液5 mL,摇匀,置恒温水浴60 ℃加热10 min,取出试管,置冰水浴中冷却15 min.分别于540 nm处测吸收光度值。以吸光度值为纵坐标,取样量为横坐标绘制标准曲线。其回归方程为:Y=7.52×10-3X-0.024 4,r=0.999 3.
  
  2.5 回收率测定
  
  称取合欢皮样品2份,其中1份加齐墩果酸一定量,并依上法处理与测定,重复5次,其平均回收率为96.9%,RSD=1.69%,结果见表1. 表1 回收率试验结果(略)
  
  2.6 样品含量的测定
  
  吸取合欢皮、山合欢皮供试品溶液各50 μL和对照品溶液40 μL,分别置于试管中,挥干,各精密加入8%香草醛乙醇溶液0.5 mL,72%硫酸5 mL,摇匀,置60 ℃恒温水浴加热10 min,取出试管,置冰水浴中冷却15 min,以溶剂50 μL代替供试品溶液的同样操作制备液为空白对照,在波长540 nm处测定吸收度,计算,即得。结果见表2.表2 不同采收期合欢皮与山合欢皮中总皂苷含量测定结果(略)注:与二年生合欢皮比较,*P<0.05;与多年生山合欢皮比较,#P<0.05
  
  3 讨论
  
  本试验含量测定方法的选择是根据文献[2-3],利用合欢皮总皂苷均为三萜皂苷,且为齐墩果烷型,故采用硫酸-香草醛比色法测定合欢皮总皂苷的含量,经检测,合欢皮总皂苷的最大吸收波长与齐墩果酸一致,故选定齐墩果酸为标准对照品。样品提取方法的选择是根据查阅的文献并结合一定的预试验,采用提取皂苷的通法,用甲醇提取、禁药脱脂、正丁醇少量多次萃取得总皂苷。本试验采用比色法测定合欢皮中总皂苷的含量,操作简便,且具有较好的稳定性和重现性。
  
  针对目前商品药材中合欢皮与山合欢皮混用的现象,采用比色法来测定合欢皮、山合欢皮总皂苷的含量。结果山东产二年生合欢皮与二年生山合欢皮、多年生合欢皮与多年生山合欢皮比较总皂苷含量均有显著差异(P<0.05)。一年生、二年生与多年生的合欢皮进行比较,一年生合欢皮与二年生合欢皮有显著差异(P<0.05),二年生合欢皮与多年生合欢皮无显著差异(P>0.05)。考虑到保护生态资源,采收合欢皮应以多年生为宜。

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